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造血干細(xì)胞-表面標(biāo)志

 由于造血組織中造血干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)方面無(wú)法與其它單核細(xì)胞區(qū)別,而且數(shù)量極少,這為造血干細(xì)胞的分離純化并對(duì)其功能分析和分化的研究造成極大困難。

由于單克隆抗體技術(shù)的進(jìn)步,流式細(xì)胞儀(FACS)的應(yīng)用,以及對(duì)小鼠和人造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究,取得了很大進(jìn)展,為造血細(xì)胞的分離純化及鑒定創(chuàng)造了條件。

1.Thy-1與絲裂原(wheatgermagglutininWGA)Visseer等發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓中造血干細(xì)胞對(duì)WGA有高親和性。利用這一特性,應(yīng)用FACS自骨髓中分離造血干細(xì)胞應(yīng)及核系Mac-1等譜系抗原與WGA反應(yīng)性相結(jié)合,即可自骨髓中Lin-/WGA 細(xì)胞群中分離造血干細(xì)胞,也獲得良好結(jié)果。

也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)正常小鼠骨髓細(xì)胞中,也能表達(dá)低密度Thy-1抗原(Thy-11)。如與上述標(biāo)志組合,即自骨髓Thy-11。Lin-WGA 細(xì)胞群中,分離造血干細(xì)胞,可用于對(duì)造血細(xì)胞的功能分析。

2.干細(xì)胞抗原(stemcellantigen-1Sca-1)有學(xué)者制備一種抗原前T細(xì)胞雜交瘤的單克隆抗體,用這種單抗檢出的抗原分子稱為干細(xì)胞抗原-1(Sca-1)。其后有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1 細(xì)胞群中,可分離純?nèi)嗽煅杉?xì)胞。

3.原癌基因(c-kit)最近證明造血干細(xì)胞與c-kit基因密切相關(guān)。C-kit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應(yīng)用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細(xì)胞膜上,其后證明它的配體分子是造血干細(xì)胞因子(stemcellfactorSCF)。它是信號(hào)傳導(dǎo)分子,對(duì)造血干細(xì)胞的分化具有重要作用。小鼠多能干細(xì)胞表面分子標(biāo)志可視為Thy-1Io、WGA 、c-kit 、Lin-。

c-kit分子可高頻率表達(dá)于多能干細(xì)胞表面,但骨髓中c-kit 細(xì)胞可分化為各種血細(xì)胞,而胸腺中c-kit細(xì)胞可分化為淋巴細(xì)胞,不能分化為髓系細(xì)胞,所以胸腺內(nèi)c-kit 細(xì)胞,可能是淋巴樣干細(xì)胞。

4.CD34對(duì)人體造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究,是用單克隆抗體CD34證明的。CD34單克隆抗體檢測(cè)的抗原即為CD34分子。自人骨髓細(xì)胞中應(yīng)用FACS可分離純化CD34 細(xì)胞群,如與造血因子共同體外培養(yǎng)可獲得含有各種血細(xì)胞的混合集落,所以CD34 細(xì)胞為骨髓中造血干細(xì)胞,CD34抗原可視為骨髓造血細(xì)胞標(biāo)志之一。

 
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